技術(shù)專(zhuān)欄
-
NF-κB經(jīng)典信號(hào)通路
NF-kB(核因子激活的B細(xì)胞的k-輕槌增強(qiáng))在細(xì)胞因子誘導(dǎo)的基因表達(dá)中起關(guān)鍵性的調(diào)控作用，它調(diào)控的基因編碼：急性期反應(yīng)蛋白、細(xì)胞因子、細(xì)胞粘附分子、免疫調(diào)節(jié)分子、病毒癌基因、生長(zhǎng)因子、轉(zhuǎn)錄和生長(zhǎng)調(diào)控因子等。通過(guò)調(diào)控多種基因的表達(dá)，NF-kB參與免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡、腫瘤發(fā)生等多種生物進(jìn)程。 NF-kB家族有由cRel, RelA (p65) , RelB, NF-kB1 (p50)、NF-kB2 (p52)組成,它們?cè)贜端都具有Rel同源結(jié)構(gòu)域，其中cReI, ReIA (p65)和ReIB存在轉(zhuǎn)錄激活區(qū)(TAD)，可正向調(diào)節(jié)基因表達(dá)；p52和p50分別由前體蛋白p100、
2022-07-21
-
PCR、qPCR、RT-PCR、Real-time PCR區(qū)別淺析
PCR技術(shù)介紹： 聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction,PCR）是在體外酶促擴(kuò)增特定DNA片段的技術(shù)，由美國(guó)Kary Mullis及其同事于1985年發(fā)明。熱穩(wěn)定性Taq DNA聚合酶的應(yīng)用和自動(dòng)化裝置的發(fā)明與完善，使PCR技術(shù)進(jìn)入實(shí)用階段。該技術(shù)的發(fā)明和廣泛應(yīng)用，大大推動(dòng)了分子生物學(xué)各相關(guān)學(xué)科的發(fā)展，發(fā)明者也因此獲得了1993年的諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。 隨著PCR技術(shù)的成熟，派生了不少相關(guān)技術(shù)。這類(lèi)技術(shù)具有敏感、特異、快速和簡(jiǎn)單等優(yōu)勢(shì)，在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用越來(lái)越廣，不少?lài)?guó)家將其納入檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)方法；
2022-07-13
-
PD-1人源化小鼠模型介紹
品系背景∶C57BL/6N 品系構(gòu)建策略∶ 在小鼠PD-1基因位點(diǎn)敲入人源PD-1胞外域序列，保留小鼠跨膜域和胞內(nèi)域，構(gòu)建嵌合型PD-1人源化小鼠模型。 品系說(shuō)明∶ hPD-1在小鼠體內(nèi)具有正常的生理表達(dá)和調(diào)節(jié)模式。 PD-1胞外域人源化，利于hPD-1靶向藥物的識(shí)別。 保留小鼠PD-1胞內(nèi)域，保證正常的胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。 小鼠靶基因不表達(dá)，避免交叉反應(yīng)。 小鼠的免疫系統(tǒng)功能健全。 研究應(yīng)用∶ 本模型可用于評(píng)估hPD-1靶向藥物在免疫健全小鼠體內(nèi)的有效性及安全性∶ 與人源化腫瘤細(xì)胞系聯(lián)用 例如∶與MC38-hPD-L1腫瘤細(xì)胞
2022-05-23
-
簡(jiǎn)述鐵死亡與慢性病鐵代謝調(diào)控機(jī)制
鐵是人體必需的微量元素，不僅參與血紅素合成，而且作為一些關(guān)鍵酶的輔基在多種生理代謝中發(fā)揮重要功能。鐵缺乏可引發(fā)缺鐵性貧血。人類(lèi)遺傳性血色病是一類(lèi)由基因突變引 起的鐵過(guò)載疾病，導(dǎo)致多個(gè)器官中鐵積累，皮膚色素沉積及多種器官的病變，如2型糖尿病、 肝纖維化等。超過(guò)85% 血色病患者攜帶遺傳性血色素沉著病蛋白（hemochromatosis protein，HFE）突變基因, 少數(shù)患者攜帶鐵調(diào)素(hepcidin，HAMP)、 鐵調(diào)素調(diào)節(jié)蛋白(hemojuvelin,HJV)、鐵外排蛋白(ferroportin 1,FPN)或轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrinreceptor,TFR)2突變基因，近
2022-05-23
-
炎癥因子白介素6
白介素-6 白細(xì)胞介素是非常重要的細(xì)胞因子家族，截至2022年，得到承認(rèn)的成員已達(dá)40個(gè)；它們?cè)诿庖呒?xì)胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過(guò)程中均發(fā)揮重要作用，此外白細(xì)胞介素還參與機(jī)體的多種生理及病理反應(yīng)。 白細(xì)胞介素6(interleukin6, IL-6)是細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)中的重要成員，在急性炎癥反應(yīng)中處于中心地位。白介素6于1980年由Weissenbach發(fā)現(xiàn)，是一種多功能細(xì)胞因子，在人體代謝、自身免疫細(xì)胞分化、疾病治療等方面都有重要作用。 IL-6結(jié)構(gòu)特性 ? IL-6是小分子多肽，由四個(gè)α螺旋組成。分子量為19-28KD,具有184個(gè)氫基酸殘基，
2022-05-23
-
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor beta）（第二章）
TGF-β信號(hào)通路 TGF-β通過(guò)TGF-βI型受體（TGF-βRI或ALK5）和TGF-βII型受體（TGF-βRII）觸發(fā)信號(hào)傳導(dǎo)，這兩種受體都是跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶受體。 ? 與TGF-β結(jié)合后，TGF-βRII作為高親和力的TGF-β受體招募并磷酸化TGF-βRI的胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域，形成異四聚體，隨后激活下游信號(hào)的SMAD蛋白。 SMAD依賴(lài)的經(jīng)典通路是TGFβ信號(hào)傳導(dǎo)的核心部分。哺乳動(dòng)物中有8種SMAD蛋白分為三類(lèi)，包括受體相關(guān)SMADs（R-SMADs）、協(xié)同SMADs（co-SMADs）和抑制性SMAD（I-SMADs）。 ? TGF-β與受體結(jié)合
2022-05-23
-
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（transforming growth factor beta）（第一章）
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β （TGF-β） 的最初發(fā)現(xiàn)是因?yàn)樗艽碳ご笫蟪衫w維細(xì)胞株的生長(zhǎng)。近三十年來(lái)，TGF-β得到了進(jìn)一步深入的研究，尤其是其在腫瘤微環(huán)境 （TME） 中的雙重作用，即被稱(chēng)為“TGF-β悖論”，可為亦正亦邪的存在。 在早期腫瘤中，TGF-β通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤細(xì)胞增殖。相反，到晚期，它通過(guò)調(diào)節(jié)基因組不穩(wěn)定性、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換 （EMT） 、新血管生成、免疫逃避、細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和轉(zhuǎn)移等方面具有促進(jìn)腫瘤的作用。TGF-β作為一種免疫抑制細(xì)
2022-05-23
-
腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)
定義1：主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，能殺傷和抑制腫瘤細(xì)胞，促進(jìn)中性粒細(xì)胞吞噬，抗感染，引起發(fā)熱，誘導(dǎo)肝細(xì)胞急性期蛋白合成，促進(jìn)髓樣白血病細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化，促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化，是重要的炎癥因子，并參與某些自身免疫病的病理?yè)p傷。 定義2：一種由巨噬細(xì)胞對(duì)細(xì)菌感染或其他免疫源反應(yīng)自然產(chǎn)生的細(xì)胞因子。與干擾素協(xié)同作用可殺死腫瘤細(xì)胞。 定義3：主要由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，能殺傷和抑制腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞因子。促進(jìn)中性粒細(xì)胞吞噬，抗感染，引起發(fā)熱，誘導(dǎo)肝細(xì)胞急性期蛋白合成，促進(jìn)髓樣白血病細(xì)胞向巨噬細(xì)胞分化，促進(jìn)細(xì)胞增殖和分化，是重要的炎癥介質(zhì)，并參與某些自身免疫病的
2022-05-04
在線(xiàn)咨詢(xún)
Online consultation
-
在線(xiàn)咨詢(xún)
-
技術(shù)支持
關(guān)注微信公眾號(hào)
